烟台科瑞斯生物
主营产品:藻红蛋白,别藻蓝蛋白,链霉亲和素标记藻红蛋白,SA-PE,交联别藻蓝蛋白
科瑞斯藻红蛋白硫酸铵沉淀脱盐方法【烟台科瑞斯】藻红蛋白
  • 联系人:刘经理
  • QQ号码:3800305
  • 电话号码:0535-3800305
  • 手机号码:17362126717
  • Email地址:liuchuanyu@crystalbiosystems.com
  • 公司地址:山东省烟台市芝罘区高新区科技大道39号
产品介绍

科瑞斯藻红蛋白硫酸铵沉淀脱盐方法【烟台科瑞斯】藻红蛋白

  科瑞斯可提供藻红蛋白有三种形式,分别为浓溶液、冻干粉和硫酸铵沉淀。其中,浓溶液保存期较短,冻干粉中含有各类保护剂,硫铵沉淀由于其稳定性,为常用。但是使用前,需要对硫铵沉淀完全换液脱盐,目前藻红蛋白硫铵沉淀脱盐常见有3种方法,分别为超滤法、脱盐柱法、透析法。

一、超滤法:

1.所需耗材:根据藻红蛋白量选择不同型号30KD超滤管。

2.操作流程:

①藻红蛋白硫酸铵沉淀吹匀,取使用量到离心管中,配平,12000r离心5分钟,吸出上清溶液。

②离心管中加入适量PBS溶解离心后沉淀,取到超滤管中,加入PBS至刻度线,配平,4000r,4℃,离心10分钟。

③取出超滤管,倒掉超滤管下方液体,上方蛋白补加PBS至刻度线,混匀,配平,4000r,4℃,离心10分钟。

④重复步骤3操作8次,达到完全换液。

⑤最后一次换液完成后继续浓缩,直至达到目标浓度,完成藻红蛋白硫铵沉淀换液及浓缩。

二、脱盐柱法:

1.所需耗材:根据藻红蛋白量选择不同体积G25脱盐柱。

2.操作流程:

①藻红蛋白硫酸铵沉淀配平,12000r离心5分钟,吸出全部上清硫铵溶液,保留沉淀。

②每毫克蛋白沉淀加入200μLPBS溶液,混匀,得到澄清蛋白溶液。

③使用G25脱盐柱纯化,脱盐柱配平后,藻红蛋白上样体积控制在柱体积5%以内,确保完全脱盐。

④收集脱盐后的藻红蛋白,测量浓度。如浓度达不到使用要求,可采用30KD超滤管浓缩。

三、透析法:

1.所需耗材:根据藻红蛋白量选择不同大小8—14KD透析袋

2.操作流程:

①透析袋用纯净水泡软后,用流动纯净水清洗。

②藻红蛋白硫酸铵沉淀配平,12000r离心5分钟,吸出全部上清硫铵溶液,保留沉淀。

③每毫克蛋白沉淀加入200μLPBS溶液,混匀,得到澄清蛋白溶液,加入到透析袋中,将透析袋封闭好放入烧杯。

④按照藻红蛋白和缓冲液体积比1:50加入缓冲液到烧杯中,加入转子,将烧杯防至磁力搅拌器上方,搅拌透析,放入4℃冰箱。

⑤每2小时换一次透析液,重复4次。最后一次透析建议过夜进行。

⑥收集脱盐后的藻红蛋白,测量浓度。如浓度达不到使用要求,可采用30KD超滤管浓缩。

四、总结

三种换液方法中,超滤法操作繁琐,需实验人员多次操作;透析法时间较长,一般要隔天使用,但成本低,操作容易;脱盐柱法相对较为简便,处理时间快,但要考虑上样体积,上样体积大需要更换更大脱盐柱或者分批多次脱盐。

五、相关产品目录

产品名称

形态

货号

包装规格

R-藻红蛋白(R-PE)

浓溶液

68047

5mg

100mg

500mg

R-藻红蛋白(R-PE)

硫铵沉淀

68048

5mg

100mg

500mg

R-藻红蛋白(R-PE)

冻干粉

68049

1mg

5mg

100mg

PE-Cy5

冻干粉

68057

1mg

PE-

冻干粉

68058

1mg

PE-Cy7

冻干粉

68056

1mg

Streptavidin-PE

溶液

68053

200μg

1mg

SMCC活化藻红蛋白

冻干粉

68055

1mg

5mg

100mg


【联系方式】

座机:0535-3800305


手机:17362126717


地址:山东省烟台市高新区科技大道39号


邮箱:liuchuanyu@


网站:www.

















相关推荐
查看更多产品